1.File->Open->打开需要分析的WB条带。

2.Image–>Type->8-bit,将图像转换为8-bit的灰度图片;Image->Invert，黑白反转，得到如下图片：

3.Analyze->Calibrate,校正光密度值Function中选择Uncalibrated OD，左下方Global calibration，勾选表示有多张图片打开时对所有图片进行此操作。否则只对当前图片进行此操作。

4.在工具栏中选择矩形工具——Rectangular,最左边的为矩形工具，选择条带：

键盘上按数字1，弹出如下提示框：

点Yes，键盘上按数字3，得到如下：

5.工具栏中选择直线工具——Straight，下图最右边的为直线工具，按住Shift键使用直线工具画竖线将步骤4的峰进行分割：

6.选择魔棒工具——Wand tool，分别点击分割好的峰，即可得到结果，保存结果File->Save as…即可：

7.WB统计分析一般将对照组标准化为100%或1，上述结果6个条带前3个为对照组。在Excel中，先计算对照组3个的平均值AVERAGEB2:B4：然后所有B列的数值除以对照组平均值，此时对照组的均值为1：

8.将所得数据放入Graphpad prism绘图即可：